行測常識判斷考點范圍很廣，一般包括政治、法律、經濟、人文、地理、科技、生活等方面，需要小伙伴們長時間不間斷的積累。今天浙江公務員考試網（iofate.cn）給大家?guī)淼某ＷR相關考點是“生物基因工程”。

 

　　基因工程是指按照人們的愿望，進行嚴格的設計，通過體外DNA重組和轉基因技術，賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品?；蚬こ淌窃贒NA分子水平上進行設計和施工的，又叫做DNA重組技術。

 

　　操作水平：DNA分子水平

 

　　原理：基因重組

 

　　優(yōu)點：1.突破物種界限。 2.定向改造生物的遺傳特性。

 

　　（一）基因工程的基本工具

 

　　1.“分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）

 

　?。?）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。

 

　?。?）功能：能夠識別特定的核苷酸序列，并在特定的切點切割，因此具有專一性。

 

　?。?）作用的化學鍵：切割磷酸二酯鍵。

 

　　(4)結果：經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

 

　　2.“分子縫合針”——DNA連接酶

 

　　(1)作用：將兩個具有相同粘性末端的DNA片段連接起來，形成重組DNA

 

　?。?）連接的化學鍵：磷酸二酯鍵

 

　　（3）與DNA聚合酶作用的異同:

 

　　DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

 

　　DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

 

　　3.“分子運輸車”——運載體

 

　　（1）載體具備的條件：

 

　?、倌茉谑荏w細胞中復制并穩(wěn)定保存。

 

　?、诰哂幸恢炼鄠€限制酶切點，供外源DNA片段插入。

 

　　③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

 

　?。?）最常用的載體是質粒,它是一種環(huán)狀DNA分子。

 

　?。?）其它載體：噬菌體、動植物病毒

 

　　(二)基因工程的基本操作程序

 

　　第一步：目的基因的獲取

 

　　1.從基因文庫中獲取（不知道目的基因的核苷酸序列的情況下采用）

 

　　2.人工合成。常用方法有：

 

　?。?）反轉錄法（已經獲得mRNA的情況下采用）

 

　?。?）化學合成法（知道目的基因的核苷酸序列、基因比較小的情況下采用）

 

　　3.PCR技術擴增目的基因（知道目的基因兩端的核苷酸序列、基因比較大的情況下采用）

 

　?。?）PCR的含義：是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術。

 

　?。?）目的：獲取大量的目的基因

 

　　（3）原理：DNA雙鏈復制

 

　?。?）過程：

 

　　第①步：變性，加熱至90～95℃DNA解鏈為單鏈；（高溫解旋）

 

　　第②步：復性，冷卻到55～60℃，引物與兩條單鏈DNA結合；

 

　　第③步：延伸，加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進行互補鏈的合成。

 

　?。?）特點：指數形式擴增

 

　　第二步：基因表達載體的構建(核心)

 

　　1.目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。

 

　　2.組成：目的基因＋啟動子＋終止子＋標記基因

 

　?。?）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄mRNA。

 

　?。?）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段 ，位于基因的尾端，使轉錄停止。

 

　?。?）標記基因的作用：鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

 

　　常用的標記基因是抗生素基因。

 

　　第三步：將目的基因導入受體細胞_

 

　　1.轉化的概念：是目的基因進入受體細胞內，并且在受體細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程。

 

　　2.常用的轉化方法：

 

　　將目的基因導入植物細胞：采用最多的方法是 農桿菌轉化法，其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等。

 

　　將目的基因導入動物細胞：最常用的方法是 顯微注射技術。方法的受體細胞多是 受精卵。

 

　　將目的基因導入微生物細胞：感受態(tài)細胞法：用 Ca2+ 處理細胞

 

　?。ㄊ蛊涑蔀?感受態(tài)細胞 ，再將 重組表達載體DNA分子 溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化過程）

 

　　原核生物作為受體細胞的優(yōu)點： 繁殖快、多為單細胞、遺傳物質相對較少

 

　　第四步：目的基因的檢測和表達

 

　　1.首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術。

 

　　2.其次還要檢測目的基因是否轉錄出mRNA，方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術。

 

　　3.最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質，方法是采用抗原—抗體雜交技術。

 

　　4.有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定等。

 

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　　基因工程的應用

 

　　1.植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質。

 

　　2.動物基因工程：提高動物生長速度；改善畜產品品質；用轉基因動物生產藥物：如乳腺生物反應器和膀胱生物反應器，方法是將目的基因導入哺乳動物的受精卵中，使其發(fā)育成轉基因動物。

 

　　3.基因治療是把正?；驅氩∪说捏w內，使該基因的表達產物發(fā)揮功能，從而達到治療的目的，這是治療遺傳病最有效的手段。

 

　　4.基因診斷：又稱為DNA診斷，是采用基因檢測的方法來判斷患者是否出現了基因異常或攜帶病原體。

 

　　刷題鞏固

 

　　1、下列關于基因工程敘述正確的是（  ）

 

　　A．各種遺傳病的基因異常是不同的，同一遺傳病的基因異常是相同的

 

　　B．一種基因探針能檢測水體中的各種病毒

 

　　C．基因治療就是把缺陷基因誘變成正常基因

 

　　D．基因診斷的基本原理就是DNA分子雜交

 

　　解析：第一步，本題考查生物醫(yī)學知識。

 

　　第二步，基因診斷，又稱DNA診斷或分子診斷，該技術的基本原理是：互補的DNA單鏈能夠在一定條件下結合成雙鏈，即能夠進行DNA分子雜交。

 

　　因此，選擇D選項。